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分子诊断研发不用愁,看看一步法多重PCR试剂盒(基于探针)

发布者:中欧体育 科技    发布时间:2019-01-15     
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多重PCR试剂盒

 

       多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应。其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同,但多重PCR和在很多应用中有巨大的优势,深受分子诊断领域研究者与开发者的喜爱:

 

  1.       1.高通量 (每个反应孔可分析更多样本,产出显著提高)
  2.       2.更低的样本用量和试剂用量(特别适合珍稀样品,降低成本)
  3.       3.更高的实验精度,使加样精度错误最小化

 

      多重PCR目前也面临着一些问题:

 

      1.PCR通常需要充分优化退火条件,以便对不同的引物–模板系统实现最高效率的扩增。这种类型的PCR经常受到非特异性PCR产物的影响。严格的热启动程序和特别优化的缓冲溶液系统对于成功的多重PCR绝对是非常关键的。

      2.多重PCR所面对的另外一个挑战是,不同的引物对之间,杂交动力学性质不同。结合效率更高的引物能更充分的利用PCR反应试剂,从而导致其它PCR产物的减少。这通常会导致一些本应该被扩增的产物没有出现。有一些商业化的试剂盒经过特别的设计,可以避免这种情况。

 

      Real-time RT-PCR可以通过一步法或者两步法完成,两者各有优劣。一步法快速的流程,可以迅速的处理多个样本,并且易于实现自动化。操作步骤的减少提高了不同样本结果的可重复性,并且由于减少了操作,降低了样本被污染的风险。

 

      为此,我们推荐使用Solis BioDyne研发的高灵敏度、高特异性、高稳定性的一步法多重PCR试剂盒-(基于探针),SOLIScript 1-step Multiplex Probe 试剂盒系列产品

 

名称 货号 兼容的PCR仪器 不兼容的Probe报告染料
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit 08-55-00250

所有PCR仪器;但Applied

BioSystems™和Agilent除外

 
08-59-00250

Applied

BioSystems™

和Agilent的PCR仪器

ROX

JUN

Texas Red

08-61-00250

Applied BioSystems™ PCR仪器(需含Mustang

Purple®通道)

Cy5

 

      SOLIScript™ 1-step Multiplex Probe Kit(一步法多重PCR试剂盒-基于探针)可在同一个管子中高特异性的执行cDNA合成与基于探针的qPCR反应。更多优点如下:

 

一步法多重PCR试剂盒-基于探针

 

  •       1.卓越的特异性:独家改造的耐热型逆转录酶,cDNA合成高达60℃。
  •       2.多重反应(高通量):一个反应可同时分析1-4个靶标。
  •       3.反应体系配置,无需冰块:专利的蛋白稳定技术,即使室温保存有效期高达30天。
  •       4.无惧高GC含量PCR:独家优化的buffer配方。
  •       5.预防交叉污染:内含dUTP,可匹配尿嘧啶糖苷酶(UNG)使用。
  •       6.广泛的设备兼容性:如上表格

 

      多重PCR试剂盒组分:

 

     1.5x One-step Multiplex Probe Mix

     HOT FIREPol® DNA聚合酶,反应缓冲液, dNTPs(含dUTP), 15 mM MgCl2 (终浓度为3 mM MgCl2)

     2.40x One-step SOLIScript Mix

     SOLIScript逆转录酶, RiboGrip RNase Inhibitor(RNase强效结合蛋白,抑制RNA降解)

     3.Water(无核酸酶)

 

 

      可靠的实验结果展示:

 

 

multiplex PCR results

 

      对提取的人来源的总RNA进行5个浓度梯度的10倍稀释(每个反应:4000pg/ul - 0.4pg/ul),各浓度样品均使用Solis BioDyne的一步法多重PCR试剂盒,同时分析4个靶标。PCR仪器为:Applied BioSystems™ QuantStudio™ 6 cycler。

 Solis BioDyne的一步法多重PCR试剂盒

多重PCR,丝毫不影响PCR的灵敏度

 

Solis BioDyne的一步法多重PCR试剂盒

Solis BioDyne的一步法多重PCR试剂盒性能优于国际知名品牌

 

      除了上述的高端的分子诊断研发神器,Solis BioDyne为客户提供终点PCR(end-point PCR),qPCR(real-time PCR),反转录PCR(Reverse transcription),以及其它PCR所需的配套试剂。产品线纵览图如下:

 

Solis BioDyne产品线

 

      Solis BioDyne来源于欧盟-爱沙尼亚共和国,自1995年以来,Solis BioDyne一直致力于开发和生产高品质的生命科学试剂,现已成为当今欧洲领先的试剂供应商之一。高标准的生产标准和服务使Solis BioDyne成为全球值得信赖的首选PCR供应商。我们的DNA聚合酶,PCR Master Mixes,qPCR Mixes和其它试剂被全球110多个国家的研究者所使用,包括顶级研究机构和生物技术公司。

 

      Solis BioDyne拥有独家的蛋白质稳定技术专利,确保其PCR酶与PCR Mixes产品具有极高的稳定性,研究者可以常温运输以及常温下配置PCR反应体系(无需冰盒)。即使是室温放置30天,其酶活性也没有损耗。

 

      作为Solis BioDyne在中国的区域总代理,中欧体育 科技有限公司将为中国客户提供最全面的Solis BioDyne产品以及订制服务。

 

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