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  • 重组腺病毒构建,扩增及纯化基本技术操作

    一、目的基因的克隆(以pshuttl-CMV质粒为例)1.选择适当酶切位点,进行酶切连接,将目的片段插入 pshuttl-CMV 质粒多克隆位点。

    2021-05-20 浏览量:
  • ELISPOT/藻酸盐包裹实验

    ELISPOT1.PBS 溶解抗原为 30 μg/ml,加 100 μl/孔于 PVDF 膜铺底的 96 孔灭菌板过夜;2. 第二天吸去包被液后,加 5%FCS 的 PRMI 1640 培养基 100 μl 封闭 1 小时,37 oC;3. 准备脾

    2021-05-20 浏览量:
  • 血清学筛选克隆新抗原/新基因

    1.将 E.coli /phage lysate 以 1:10-20 稀释在 TBST 溶液中。
    2.将 4 张 82mm 的 nitrocellulose membranes(NC)浸入稀释后的 E.coli/ phage
    lysate 中,室温下水平摇动 30 分钟,取出 NC 并使膜沥干。
    3.用 50ml TBST 溶液洗膜 3 次,每次 10 分钟。

    2021-05-20 浏览量:
  • 血清制备/ELISA

    血清制备
    1.取血后,37oC 下,让血液凝固 1 到 2 小时(不加抗凝剂);
    2.4oC 冰箱过夜(让血块固缩);
    3.当血清自然析出后, 4oC,3000 转/分,离心 10 分钟,分离血清,弃去

    2021-05-19 浏览量:
  • 实验动物免疫方案

    第一次免疫用完全佐剂与免疫原混合,以后加强免疫用不完全佐剂与免疫原
    混合,采取多点,时间间隔式免疫法

    2021-05-19 浏览量:
  • 人脐静脉内皮细胞( HUVEC)培养

    将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。(注:4℃下最多贮存 24 小时,室温下不超过 6 小时,否则废弃)

    2021-05-19 浏览量:
  • 肿瘤动物模型的建立/小鼠尾静脉注射方法/肿瘤蛋白疫苗预防性动物实验

    将对数生长的肿瘤细胞收集, 用无血清基质 10.0ml, 于 1500 转/分, 离心3min, 连续洗 3 次, 最后用无血清基质混匀, 用血球计数器计算肿瘤细胞数量(平均 5 个中方格的细胞计数×1000444即是肿瘤数/毫升)

    2021-05-19 浏览量:
  • 肿瘤细胞体外传代培养及保种

    细胞复苏与培养

    2021-05-19 浏览量:
  • 转染细胞的稳定筛选

    确定抗生素作用的最佳浓度

    2021-05-19 浏览量:
  • 真核细胞的转染

    该操作以 Invitrogen 公司的脂质体转染试剂 LipofectAMINE 为例,其它转染试剂可参照各自的使用说明书进行。

    2021-05-19 浏览量:
  • 重组子的筛选和鉴定

    重组子可通过酶切进行鉴定,也可以利用扩增引物通过 PCR 进行鉴定,阳性重组子能切出所需要的片段或得到相应片段的 PCR 产物

    2021-05-19 浏览量:
  • 转化

    取 100ul感受态细胞于冰浴上融化

    2021-05-19 浏览量:
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